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通用基因組DNA提取試劑盒

通用基因組DNA提取試劑盒使用說明書

貨號(hào)：D2100

規(guī)格：50T/ 100T

價(jià)格：400/700

保存：室溫(15℃-25℃) 干燥保存，復(fù)檢期12個(gè)月，2℃-8℃保存時(shí)間更長。開封后請將RNase A，蛋白酶K

于-20℃保存。

產(chǎn)品簡介:

本試劑盒為通用型，適合于從土壤，糞便，昆蟲，以及其他樣本中提取基因組DNA。對(duì)細(xì)菌，真菌，昆蟲等樣本都具有很好的裂解效果，大限度的保留了生物DNA的多態(tài)性。

使用本試劑盒提取的DNA產(chǎn)量大、完整性好，可直接用于各種常規(guī)操作，包括酶切、PCR 、文庫構(gòu)建、Southern 雜交等實(shí)驗(yàn)。

操作步驟：

使用前請先在漂洗液中加入無水乙醇，加入體積請參照瓶上的標(biāo)簽。所有離心步驟均為使用臺(tái)式離心機(jī)在室溫下離心。

1、樣品的處理：

      1）土壤：稱取0.1-0.3g (根據(jù)干濕)土壤，放入研缽中，倒入適量的液氮，立即研磨，重復(fù)3 次，使土壤顆粒研成粉末，加500ul溶液A，振蕩至徹底懸浮。

      2）糞便：稱取0.1-0.3g (根據(jù)干濕) 糞便，加500ul溶液A，振蕩至徹底懸浮。

      3）昆蟲：稱取0.1-0.3g昆蟲，倒入適量的液氮，立即研磨，重復(fù)3次，使昆蟲研成粉末，加500ul溶液A，振蕩至徹底懸浮。

      4）未知樣品，如為細(xì)未狀，可直接稱取0.1-0.3g(根據(jù)干濕)加500ul溶液A，如為塊狀，可0.1-0.3g用液氮研磨成粉未，再加500ul溶液A，振蕩至徹底懸浮。

2、向懸浮液中加入20ul的RNase A（10mg/ml），55℃放置10min。

3、加入20ul的蛋白酶K（10mg/ml），充分混勻，55℃水浴消化，30min。消化期間可顛倒離心管混勻數(shù)次，12000轉(zhuǎn)離心10min。將上清轉(zhuǎn)移到一個(gè)新的離心管中。如有沉淀，可再次離心。

4、加入500ul溶液B，充分混勻。如出現(xiàn)白色沉淀，于55℃放置5min，沉淀即會(huì)消失，不影響后續(xù)實(shí)驗(yàn)。如溶液未變清亮，說明樣品消化不徹底，可能導(dǎo)致提取的DNA量少及不純，還有可能導(dǎo)致上柱后堵柱子，請?jiān)黾酉瘯r(shí)間。

5、加入500ul無水乙醇，充分混勻，此時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀沉淀，不影響DNA的提取，可將溶液和絮狀沉淀都加入吸附柱中，放置2min (分兩次加入，每次700ul)。

6、12000rpm離心2min，棄廢液，將吸附柱放入收集管中。

7、向吸附柱中加入600ul漂洗液(使用前請先檢查是否已加入無水乙醇)，12000rpm離心1min，棄廢液，將吸附柱放入收集管中。

8、向吸附柱中加入600ul漂洗液，12000rpm離心1min，棄廢液，將吸附柱放入收集管中

9、12000rpm離心2min，將吸附柱置于室溫或50℃溫箱放置數(shù)分鐘，目的是將吸附柱中殘余的漂洗液去除，否則漂洗液中的乙醇會(huì)影響后續(xù)的實(shí)驗(yàn)如酶切、PCR等。

10、將吸附柱放入一個(gè)干凈的離心管中，向吸附膜中央懸空滴加50-200ul經(jīng)65℃水浴預(yù)熱的洗脫液，室溫放置5min，12000rpm離心2min。

11、離心所得洗脫液再加入吸附柱中，室溫放置2min，12000rpm離心2min，即可得到高質(zhì)量的基因組DNA。

注意事項(xiàng):

1、由于樣品不同，終提取的DNA含量和純度也有所不同，一般來說，如果所提取DNA用電泳的方法檢測不到，PCR會(huì)有結(jié)果，樣品盡可能的新鮮。否則會(huì)導(dǎo)致提取的DNA片段較小且提取量也下降。

2、若試劑盒中的溶液出現(xiàn)沉淀，可在65℃水浴中重新溶解后再使用，不影響提取效果。

3、如果樣品消化不徹底，后面的離心步驟中可能會(huì)出現(xiàn)堵柱子的情況，可適當(dāng)延長離心時(shí)間。

4、洗脫緩沖液的體積好不少于50ul，體積過小會(huì)影響回收效率；洗脫液的pH值對(duì)洗脫效率也有影響，若需要用水做洗脫液應(yīng)保證其pH值在8.0左右(可用NaOH將水的pH值調(diào)至此范圍)，pH值低于7.0會(huì)降低洗脫效率；DNA產(chǎn)物應(yīng)保存在-20℃，以防DNA降解。

5、DNA濃度及純度檢測（濃度較高時(shí)）：得到的基因組DNA片段的大小與樣品保存時(shí)間、操作過程中的剪切力等因素有關(guān)?；厥盏玫降?span lang="EN-US">DNA片段可用瓊脂糖凝膠電泳和紫外分光光度計(jì)檢測濃度與純度。DNA應(yīng)在OD₂₆₀處有顯著吸收峰， OD₂₆₀值為1相當(dāng)于大約50μg/ml雙鏈DNA、40μg/ml單鏈DNA。OD₂₆₀/OD₂₈₀比值應(yīng)為1.7-1.9，如果洗脫時(shí)不使用洗脫緩沖液，而使用去離子水，比值會(huì)偏低，因?yàn)?span lang="EN-US">pH值和離子存在會(huì)影響光吸收值，但并不表示純度低。

相關(guān)產(chǎn)品：

公司簡介：

     北京索萊寶科技有限公司 始創(chuàng)于 2000年， 是一家集 產(chǎn)品研發(fā)、生產(chǎn)、銷售、服務(wù)于一體的大型高科技生物企業(yè)。公司總部位于北京，擁有1200平米研發(fā)生產(chǎn)中心，公司提供的產(chǎn)品近萬種，超過5000種常備現(xiàn)貨，涵蓋分子生物學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、免疫學(xué)、生物醫(yī)學(xué)等相關(guān)領(lǐng)域，并不斷推陳新出擴(kuò)充種類，為用戶提供優(yōu)秀，專業(yè)的產(chǎn)品。  立足北京，輻射全國，隨著產(chǎn)品營銷戰(zhàn)略的不斷延伸，我們將逐步發(fā)展成為專業(yè)性生物科技公司。我們希望能夠和尊敬的客戶一起，利用各自的資源優(yōu)勢和勇于進(jìn)取的敬業(yè)精神，為中國生命科學(xué)研究的發(fā)展作出更多的貢獻(xiàn)。為了更好、更全面的發(fā)展，現(xiàn)公司正在誠招各地代理商，歡迎垂詢并期待您的加入！

北京索萊寶科技有限公司，供應(yīng)各種酶、輔酶、酶抑制劑相關(guān)產(chǎn)品以及其他生化試劑，實(shí)驗(yàn)、科研用品，參看如下產(chǎn)品類目，歡迎咨詢！

產(chǎn)品類目：

1.細(xì)胞培養(yǎng)試劑,2.細(xì)胞培養(yǎng)耗材,3.蛋白質(zhì)提取,4.蛋白質(zhì)純化,5.蛋白質(zhì)定量,6.蛋白質(zhì)電泳,7.蛋白質(zhì)Marker,8.Western blot,9.免疫組化,10.抗體,11.SABC試劑盒,12.基因組和質(zhì)粒提取試劑盒,13.核酸提取相關(guān)試劑,14.DNA電泳,15.DNA Marker,16.RNA相關(guān)試劑, 17.PCR,18.Southern blot,19.基因工程,20.生物培養(yǎng),21.堿基與核酸,22.氨基酸,23.多肽及蛋白質(zhì),24.酶,25.輔酶,26.酶抑制劑,27.維生素,28.抗生素,29.染色劑,30.糖與碳水化合物,31.生物緩沖液,32.植物生長激素,33.酸和鹽分離效,34.胺,35.層析介質(zhì),36.常用生化試劑,37.其他生化試劑,38.耗材,39.標(biāo)準(zhǔn)品,40.新增產(chǎn)品