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全血基因組DNA提取試劑盒

全血基因組DNA提取試劑盒 
 

 目錄號                            包裝                        價格
  D1800-50                         50T                        300.00
  D1800-100                        100T                       560.00

全血基因組DNA提取試劑盒說明書

貨號：D1800

規(guī)格：50T/ 100T

保存：室溫(15℃-25℃) 干燥保存，復檢期12個月，2℃-8℃保存時間更長。

產(chǎn)品簡介:

本試劑盒采用可以特異性結合DNA的離心吸附柱和獨特的緩沖液系統(tǒng)，提取全血基因組DNA。 離心吸附柱中采用的硅基質(zhì)材料為本公司特有新型材料，能夠高效、專一吸附DNA，可大限度去除雜質(zhì)蛋白及細胞中其他有機化合物。 提取的基因組DNA片段大，純度高，質(zhì)量穩(wěn)定可靠。使用本試劑盒提取的基因組DNA可用于各種常規(guī)操作，包括酶切、 PCR、文庫構建、Southern雜交等實驗。

操作步驟：

使用前請先在漂洗液和溶液B中加入無水乙醇，加入體積請參照瓶體上的標簽。所有離心步驟均為使用臺式離心機在室溫下離心。

1 、樣品的處理(本產(chǎn)品適用于處理新鮮的或已經(jīng)添加抗凝劑的0.lml-1ml 血液樣品)： 
a 、在血液樣品中加入2-3 倍體積的紅細胞裂解液，充分顛倒混勻，12000rpm離心1min，小心吸去上清，沉淀應為白色或淡紅色，如果裂解不徹底，可重復以上述步驟一次。向沉淀中加200ul 溶液A，振蕩至徹底混勻。 
b 、  如果處理的血樣為禽類、鳥類、兩棲類或更低級生物的血液，其紅細胞為有核細胞，因此處理量為5-20u1 ，不需要再用紅細胞裂解液處理，直接加200ul 溶液 A，振蕩至徹底混勻。
2 、向懸浮液中加入 20ul (10mg/ml)  的RNase A，充分顛倒混勻，室溫放置10min 。 
3 、加入 20ul ( 10mg /ml )  的蛋白酶K，充分顛倒混勻，65℃水浴消化 30-60min ，消化期間可顛倒離心管混勻數(shù)次，直至樣品消化完全為止。 
4 、加入 2 倍體積溶液 B(使用前請先檢查是否己加入無水乙醇)，充分顛倒混勻，此時可能會出現(xiàn)絮狀沉淀，不影響DNA的提取，可將溶液和絮狀沉淀都加入吸附柱中，室溫放置2min。 
5 、12000rpm離心2min，棄廢液，將吸附柱放入收集管中。 
6 、向吸附柱中加入 700ul 漂洗液(使用前請先檢查是否已加入無水乙醇)， 12000rpm 離心1min，棄廢液，將吸附柱放入收集管中。 
7 、向吸附柱中加入 500ul 漂洗液，12000rpm離心1min，棄廢液，將吸附柱放入收集管中。 
8 、12000rpm離心2min，將吸附柱敞口置于室溫或 50℃溫箱放置數(shù)分鐘，目的是將吸附柱中殘余的漂洗液去除，否則漂洗液中的乙醇會影響后續(xù)的實驗如酶切、PCR 等。 
9 、將吸附柱放入一個干凈的離心管中，向吸附膜中央懸空滴加 50-200ul 經(jīng)65℃水浴預熱的洗脫液，室溫放置5min，12000rpm離心1min。 
10、離心所得洗脫液再加入吸附柱中，12000rpm離心2min，即可得到高質(zhì)量的基因組DNA。

注意事項:

1、本試劑盒置于室溫( 15 -25℃) 干燥條件下可保存12個月，更長時間的保存可置于2 -8℃。

2、常用的血液抗凝劑有EDTA、ACD和肝素等，需注意的是，如欲制備大分子量血液基因組DNA，可優(yōu)先考慮使用ACD抗凝。一般不使用肝素抗凝，因為用肝素抗凝的血液提取的基因組DNA進行PCR擴增時，有PCR擴增抑制現(xiàn)象。

3、樣品應避免反復凍融，否則會導致提取的DNA片段較小且提取量也下降。

4、如果試劑盒中的溶液出現(xiàn)沉淀，可在65℃水浴中重新溶解后再使用，不影響效果。

5、絕大多數(shù)哺乳動物全血中的紅細胞無核，故在提取基因組DNA時需去除不含DNA的無核紅細胞，以免影響白細胞裂解和DNA釋放。如果處理的血樣為禽類、鳥類、兩棲類或更低級生物的血液，其紅細胞為有核細胞，因此處理量減少為5-20ul，不需要再用紅細胞裂解液來裂解紅細胞。

6、洗脫緩沖液的體積好不少于50ul，體積過小會影響回收效率:洗脫液的pH值對洗脫效率也有影響；若需要用水做洗脫液應保證其pH值在8.0左右(可用NaOH將水的pH值調(diào)至此范圍)，pH 值低于7.0會降低洗脫效率。

相關產(chǎn)品：

      D1850     全血基因組DNA提取試劑系統(tǒng)

       E1020     EB染色液

       D1010     6×DNA Loading Buffer

       T1060     50×TAE 緩沖液

       T1050     5×TBE 緩沖液

       M1060    D2000 DNA Ladder

       M1400    1kb DNA Ladder

       G8142     GoldView II型核酸染色劑(5000×)

公司簡介：

     北京索萊寶科技有限公司 始創(chuàng)于 2000年， 是一家集 產(chǎn)品研發(fā)、生產(chǎn)、銷售、服務于一體的大型高科技生物企業(yè)。公司總部位于北京，擁有1200平米研發(fā)生產(chǎn)中心，公司提供的產(chǎn)品近萬種，超過5000種常備現(xiàn)貨，涵蓋分子生物學、細胞生物學、免疫學、生物醫(yī)學等相關領域，并不斷推陳新出擴充種類，為用戶提供優(yōu)秀，專業(yè)的產(chǎn)品。  立足北京，輻射全國，隨著產(chǎn)品營銷戰(zhàn)略的不斷延伸，我們將逐步發(fā)展成為專業(yè)性生物科技公司。我們希望能夠和尊敬的客戶一起，利用各自的資源優(yōu)勢和勇于進取的敬業(yè)精神，為中國生命科學研究的發(fā)展作出更多的貢獻。為了更好、更全面的發(fā)展，現(xiàn)公司正在誠招各地代理商，歡迎垂詢并期待您的加入！

北京索萊寶科技有限公司，供應各種酶、輔酶、酶抑制劑相關產(chǎn)品以及其他生化試劑，實驗、科研用品，參看如下產(chǎn)品類目，歡迎咨詢！

產(chǎn)品類目：

1.細胞培養(yǎng)試劑,2.細胞培養(yǎng)耗材,3.蛋白質(zhì)提取,4.蛋白質(zhì)純化,5.蛋白質(zhì)定量,6.蛋白質(zhì)電泳,7.蛋白質(zhì)Marker,8.Western blot,9.免疫組化,10.抗體,11.SABC試劑盒,12.基因組和質(zhì)粒提取試劑盒,13.核酸提取相關試劑,14.DNA電泳,15.DNA Marker,16.RNA相關試劑, 17.PCR,18.Southern blot,19.基因工程,20.生物培養(yǎng),21.堿基與核酸,22.氨基酸,23.多肽及蛋白質(zhì),24.酶,25.輔酶,26.酶抑制劑,27.維生素,28.抗生素,29.染色劑,30.糖與碳水化合物,31.生物緩沖液,32.植物生長激素,33.酸和鹽分離效,34.胺,35.層析介質(zhì),36.常用生化試劑,37.其他生化試劑,38.耗材,39.標準品,40.新增產(chǎn)品