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動(dòng)物組織/細(xì)胞基因組DNA提取試劑盒

目錄號(hào)                   包裝                  價(jià)格
  D1700-50              50T                  300.00
  D1700-100             100T               560.00

動(dòng)物組織/細(xì)胞基因組DNA提取試劑盒

貨號(hào)：D1700

規(guī)格：50T/ 100T

保存：室溫(15℃-25℃) 干燥保存，復(fù)檢期12個(gè)月，2℃-8℃保存時(shí)間更長(zhǎng)。

產(chǎn)品簡(jiǎn)介：

本試劑盒采用可以特異性結(jié)合DNA的離心吸附柱和獨(dú)特的緩沖液系統(tǒng)，提取組織和細(xì)胞的基因組DNA。 離心吸附柱中采用的硅基質(zhì)材料為本公司特有新型材料，能夠高效、專一吸附DNA，可大限度去除雜質(zhì)蛋白及細(xì)胞中其他有機(jī)化合物。 提取的基因組DNA片段大，純度高，質(zhì)量穩(wěn)定可靠。使用本試劑盒提取的基因組DNA可用于各種常規(guī)操作，包括酶切、 PCR、文庫構(gòu)建、Southern雜交等實(shí)驗(yàn)。

操作步驟：

使用前請(qǐng)先在漂洗液中加入無水乙醇，加入休積請(qǐng)參照瓶體上的標(biāo)簽。所有離心步驟均為使用臺(tái)式離心機(jī)在室溫下離心。

1、樣品的處理：

a、細(xì)胞：取1×10⁶-1×10⁷個(gè)懸浮培養(yǎng)細(xì)胞，12000rpm離心1min收集細(xì)胞，貼壁細(xì)胞先用胰蛋白酶消化處理，再用預(yù)冷的PBS吹打成細(xì)胞懸液，然后12000rpm離心1min收集細(xì)胞，盡量除去上清，加200ul溶液A，振蕩至徹底混勻。

b、組織：組織量不宜過大，一般不要超過25mg，可以使用勻漿器勻漿，好用液氮研磨成粉末狀，再用預(yù)冷的PBS或無菌水充分懸浮，然后12000rpm離心1min收集細(xì)胞，盡量除去上清，加200ul溶液A，振蕩至徹底混勻。

2、向懸浮液中加入20ul 的RNase A (10mg/ml)，55℃放置15min。

3、加入20ul 的蛋白酶K( 10mg /ml )，充分顛倒混勻，55℃水浴消化，細(xì)胞消化時(shí)間較短，組織消化時(shí)間較長(zhǎng)，一般需要1-3個(gè)小時(shí)才能完成（鼠尾需要消化過夜）。消化期間可顛倒離心管混勻數(shù)次，直至樣品消化完全為止。消化完全的指標(biāo)是：液體清亮及粘稠。

4、加入200ul體積溶液B，充分顛倒混勻，如出現(xiàn)白色沉淀，可放置于75℃ 15-30min，沉淀即會(huì)消失，不影響后續(xù)實(shí)驗(yàn)。如溶液未變清亮，說明樣品消化不徹底，可能導(dǎo)致提取的DNA量少及不純，還有可能導(dǎo)致堵塞吸附柱。

5、加入200ul無水乙醇，充分混勻，此時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀沉淀，不影響DNA的提取，可將溶液和絮狀沉淀都加入吸附柱中。

6、12000rpm離心1min，棄廢液，將吸附柱放入收集管中。

7、向吸附柱中加入600ul漂洗液(使用前請(qǐng)先檢查是否已加入無水乙醇)， 12000rpm離心1min，棄廢液，將吸附柱放入收集管中。

8、向吸附柱中加入600ul漂洗液，12000rpm離心1min，棄廢液，將吸附柱放入收集管中。

9、12000rpm離心2min，將吸附柱敞口置于室溫或50℃溫箱放置數(shù)分鐘，目的是將吸附柱中殘余的漂洗液去除，否則漂洗液中的乙醇會(huì)影響后續(xù)的實(shí)驗(yàn)如酶切、PCR等。

10、將吸附柱放入一個(gè)干凈的離心管中，向吸附膜中央懸空滴加50-200ul經(jīng)65℃水浴預(yù)熱的洗脫液，室溫放置5min，12000rpm離心2min。

11、可將離心所得洗脫液再加入吸附柱中，12000rpm離心2min，即可得到高質(zhì)量的基因組DNA。

注意事項(xiàng):

1、試劑盒拆封后，RNase A和蛋白酶K需放置-20℃保存。

2、樣品應(yīng)避免反復(fù)凍融，否則會(huì)導(dǎo)致提取的DNA片段較小且提取量也下降。

3、如果試劑盒中的溶液出現(xiàn)沉淀，可在65℃水浴中重新溶解后再使用，不影響效果。

4、洗脫緩沖液的體積好不少于50ul，體積過小會(huì)影響回收效率：洗脫液的pH值對(duì)洗脫效率也有影響，若需要用水做洗脫液應(yīng)保證其pH值在8.0左右(可用NaOH將水的pH值調(diào)至此范圍)，pH 值低于7.0會(huì)降低洗脫效率。

相關(guān)產(chǎn)品：

   E1020     EB染色液

       D1010     6×DNA Loading Buffer

       T1060     50×TAE 緩沖液

       T1050     5×TBE 緩沖液

       M1060    D2000 DNA Ladder

       M1400    1kb DNA Ladder

       G8142     GoldView II型核酸染色劑(5000×)

公司簡(jiǎn)介：

     北京索萊寶科技有限公司 始創(chuàng)于 2000年， 是一家集 產(chǎn)品研發(fā)、生產(chǎn)、銷售、服務(wù)于一體的大型高科技生物企業(yè)。公司總部位于北京，擁有1200平米研發(fā)生產(chǎn)中心，公司提供的產(chǎn)品近萬種，超過5000種常備現(xiàn)貨，涵蓋分子生物學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、免疫學(xué)、生物醫(yī)學(xué)等相關(guān)領(lǐng)域，并不斷推陳新出擴(kuò)充種類，為用戶提供優(yōu)秀，專業(yè)的產(chǎn)品。  立足北京，輻射全國，隨著產(chǎn)品營(yíng)銷戰(zhàn)略的不斷延伸，我們將逐步發(fā)展成為專業(yè)性生物科技公司。我們希望能夠和尊敬的客戶一起，利用各自的資源優(yōu)勢(shì)和勇于進(jìn)取的敬業(yè)精神，為中國生命科學(xué)研究的發(fā)展作出更多的貢獻(xiàn)。為了更好、更全面的發(fā)展，現(xiàn)公司正在誠招各地代理商，歡迎垂詢并期待您的加入！

北京索萊寶科技有限公司，供應(yīng)各種酶、輔酶、酶抑制劑相關(guān)產(chǎn)品以及其他生化試劑，實(shí)驗(yàn)、科研用品，參看如下產(chǎn)品類目，歡迎咨詢！

產(chǎn)品類目：

1.細(xì)胞培養(yǎng)試劑,2.細(xì)胞培養(yǎng)耗材,3.蛋白質(zhì)提取,4.蛋白質(zhì)純化,5.蛋白質(zhì)定量,6.蛋白質(zhì)電泳,7.蛋白質(zhì)Marker,8.Western blot,9.免疫組化,10.抗體,11.SABC試劑盒,12.基因組和質(zhì)粒提取試劑盒,13.核酸提取相關(guān)試劑,14.DNA電泳,15.DNA Marker,16.RNA相關(guān)試劑, 17.PCR,18.Southern blot,19.基因工程,20.生物培養(yǎng),21.堿基與核酸,22.氨基酸,23.多肽及蛋白質(zhì),24.酶,25.輔酶,26.酶抑制劑,27.維生素,28.抗生素,29.染色劑,30.糖與碳水化合物,31.生物緩沖液,32.植物生長(zhǎng)激素,33.酸和鹽分離效,34.胺,35.層析介質(zhì),36.常用生化試劑,37.其他生化試劑,38.耗材,39.標(biāo)準(zhǔn)品,40.新增產(chǎn)品