土壤淀粉酶活性檢測試劑盒 可見分光光度法
- 發(fā)布日期: 2019-05-22
- 更新日期: 2025-10-18
產(chǎn)品詳請
產(chǎn)地 |
北京
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品牌 |
Solarbio
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貨號 |
BC1920
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保存條件 |
2-8℃保存
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英文名稱 |
Soil amylase activity test kit
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CAS編號 |
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保質(zhì)期 |
1年
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土壤淀粉酶(S-AL)活性檢測試劑盒說明書
可見分光光度法
產(chǎn)地:北京市通州區(qū)馬駒橋聯(lián)東U谷85A三樓
產(chǎn)品商標:solarbio
英文名稱:Soil amylase activity test kit
注意:正式測定之前選擇2-3 個預期差異大的樣本做預測定。
貨號:BC1920
規(guī)格:50T/24S
保存與運輸:4℃保存或-20℃保存;
參考價格:580
庫存狀態(tài):現(xiàn)貨
關鍵詞:土壤淀粉酶|土壤淀粉酶活性檢測|土壤淀粉酶檢測|淀粉酶
產(chǎn)品內(nèi)容:
試劑一:液體10mL×1瓶,4℃保存。
試劑二:粉劑×1瓶,4℃保存。臨用前加入5mL蒸餾水,置于常溫水中并加熱至煮沸,期間不斷攪拌或震蕩至粉劑溶解。
試劑三:液體65mL×1瓶,4℃保存。
標準品:粉劑×1支。10mg 麥芽糖,4℃保存。臨用前加入1.38mL蒸餾水配制成20μmol/mL的儲備液。
產(chǎn)品說明:
淀粉酶(EC3.2.1.1)是催化淀粉水解的一類酶的總稱。土壤中的淀粉酶主要來自于微生物,是一種重要的酶制劑,廣泛應用于糧食加工、食品、釀造、發(fā)酵、紡織品工業(yè)和醫(yī)藥行業(yè)。
淀粉酶水解淀粉產(chǎn)生還原糖,可與3,5-二硝基水楊酸反應生成紅棕色物質(zhì),在540nm處有特征吸收峰,顏色深淺在一定范圍內(nèi)與還原糖量成正比。
需自備的儀器和用品:
天平、水浴鍋、低溫離心機、可見分光光度計、1mL玻璃比色皿、甲苯。
操作步驟:
一、樣品處理:
新鮮土樣自然風干或37℃烘箱風干,過30~50 目篩。
二、測定步驟:
1. 分光光度計預熱30min,波長調(diào)至540nm。蒸餾水調(diào)零。
2. 將20μmol/mL 的麥芽糖儲備液用蒸餾水稀釋為1、0.9、0.8、0.7、0.6、0.5、0.4、0.3μmol/mL 的標準溶液備用。
3. 測定步驟:
試劑名稱 測定管 對照管 標準管 空白管
土樣(g) 0.1 0.1 - -
甲苯(μL) 20 20 - -
蒸餾水(μL) - 200 - -
試劑一(μL) 200 200 - -
試劑二(μL) 200 - - -
充分震蕩混勻,37℃水浴或37℃恒溫箱培養(yǎng)24h,之后12000rpm,常溫離心10min,取上清。
上清液(μL) 300 300 - -
蒸餾水(μL) - - - 300
標準溶液(μL) - - 300 -
試劑三(μL) 700 700 700 700
充分混勻,沸水浴10min,至冰上冷卻,于1mL 玻璃比色皿中測定540nm 處的吸光值,分別記為A 對照管、A 測定管、A 標準管和A 空白管,計算ΔA 測定=A 測定管-A 對照管,ΔA 標準=A 標準管-A 空白管。A 空白管只需測1-2 次。
三、土壤淀粉酶活力的計算:
(1)標準曲線的繪制:
以標準溶液的濃度為x 軸,ΔA 標準為y 軸繪制標準曲線,得到標準方程y=kx+b。將ΔA 測定帶入方程得到x(μmol/mL)
(2)酶活的計算:
單位的定義:每天每g 土樣產(chǎn)生1μmol 還原糖定義為一個土壤淀粉酶活力。
S-AL(U/g 土樣)=x×V 反總÷W÷T=0.42×x÷W。
V 反總:酶促反應總體積,0.42mL;
W:土樣質(zhì)量,g;
T:反應時間,1d。
注意事項:
1. 當ΔA 大于1 時,建議將上清液稀釋后再進行測定,注意在計算公式中乘以稀釋倍數(shù)。
2. 若ΔA 測定較小,增加反應的上清液體積或適當增加酶促反應時間,計算酶活時對公式進行修改。
3. 吸光值請于30min 內(nèi)測定完成。