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| 產(chǎn)地 | 北京 |
| 品牌 | Solarbio |
| 貨號(hào) | SEKM-0026 |
| 檢測(cè)限 | |
| 數(shù)量 | 10 |
| 檢測(cè)方法 | 雙抗體夾心法 |
| 標(biāo)記物 | IL-25/IL-17E |
| 樣本 | 血清、血漿或細(xì)胞培養(yǎng)上清液等樣本 |
| 應(yīng)用 | Elisa實(shí)驗(yàn) |
小鼠白細(xì)胞介素-25 ELISA 試劑盒
產(chǎn)品編號(hào)#：SEKM-0026
適用于小鼠血清、血漿或細(xì)胞培養(yǎng)上清液等樣本
背景介紹：
IL-25 是 IL-17 家族中發(fā)現(xiàn)的新成員之-，IL-17 家族是由新近發(fā)現(xiàn)的一組與 IL-17具有 29％～50％的同源性，由 155～197 個(gè)氨基酸組成的相對(duì)分子質(zhì)量大小在 20000～30000之間的細(xì)胞因子組成。目前認(rèn)為 IL-17 家族中至少有 6 個(gè)成員，它們分別是 IL-17A、IL-17B、IL-17C、IL-17D、IL-17E、IL-17F。IL-17／IL-17A 是 IL-17 家族中的主要成員。IL-25 主要由活化的 Th 細(xì)胞和肥大細(xì)胞所分泌。與其他家族成員不同，IL-25 能夠誘導(dǎo)Th2 型細(xì)胞因子如 IL-4、IL-5 和 IL-13 的產(chǎn)生，介導(dǎo) Th2 類(lèi)免疫應(yīng)答，還能夠影響 Th17 細(xì)胞的分化并調(diào)節(jié)自身免疫性疾病的發(fā)生發(fā)展?？傊?，IL-25 在多種免疫性疾病的發(fā)生發(fā)展中都發(fā)揮著重要的作用。
檢測(cè)原理：
Solarbio (Solarbio ®)ELISA 試劑盒采用基于雙抗體夾心法的酶聯(lián)免疫吸附檢測(cè)技術(shù)。將抗小鼠 IL-25/17E 單克隆抗體包被在酶標(biāo)板上；分別加入梯度稀釋的標(biāo)準(zhǔn)品和預(yù)稀釋的樣本，標(biāo)準(zhǔn)品和樣本中的小鼠 IL-25/17E 會(huì)與酶標(biāo)板上的包被抗體充分結(jié)合；洗板后加入生物素化抗小鼠 IL-25/17E 抗體，該抗體會(huì)與板子上包被抗體捕獲的標(biāo)準(zhǔn)品和樣本中的小鼠 IL-25/17E發(fā)生特異性結(jié)合；洗板后加入辣根過(guò)氧化物酶（HRP）標(biāo)記的鏈霉親和素，生物素與鏈霉親和素會(huì)發(fā)生高強(qiáng)度的非共價(jià)結(jié)合；洗板后加入顯色劑底物 TMB，若反應(yīng)孔中樣品存在不同濃度的小鼠 IL-25/17E，則 HRP 會(huì)使無(wú)色 TMB 變成不同深淺（正相關(guān)）的藍(lán)色物質(zhì)，加入終止液后反應(yīng)孔會(huì)變成黃色；*，在λmax=450 nm（OD=450 nm）處測(cè)定反應(yīng)孔樣品吸光度（OD），樣本中的小鼠 IL-25/17E 濃度與 OD 成正比，通過(guò)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)和四參數(shù)擬合軟件便可計(jì)算出樣本中小鼠 IL-25/17E 的濃度。
注意事項(xiàng)：※※※
1. 試劑盒應(yīng)在有效期內(nèi)使用，請(qǐng)不要使用過(guò)期的試劑。
2. 試劑盒未使用時(shí)應(yīng)保存在 2-8℃冰箱，已復(fù)溶但未用完的標(biāo)準(zhǔn)品，請(qǐng)丟棄。
3. 試劑盒使用前請(qǐng)?jiān)谑覝鼗謴?fù) 30 min，且充分混勻試劑盒里的各種成份及制備的樣品。
4. 在試驗(yàn)中標(biāo)準(zhǔn)品和樣本建議作復(fù)孔檢測(cè)，且加入試劑的順序應(yīng)保持一致。
5. 為避免交叉污染，請(qǐng)?jiān)谠囼?yàn)中使用 1 次性試管，槍頭，封板膜（※）及潔凈塑料容器。. 6. 濃縮生物素化抗體和濃縮酶結(jié)合物的體積較少，在運(yùn)輸過(guò)程中微量液體會(huì)沾到管壁及瓶蓋上，使用前請(qǐng)離心處理（5-10 S 即可），使管壁上的液體集中在管底部，取用時(shí)，請(qǐng)用移液器小心吹打幾次。
7. 除了試劑盒中的濃縮洗滌液和終止液可以通用外，請(qǐng)不要使用其他來(lái)源試劑盒內(nèi)含的試劑代替本試劑盒中的某單個(gè)組分。
8. 為保證結(jié)果準(zhǔn)確，每次檢測(cè)均需做標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)。
安全提示：試劑盒中的終止液為酸性溶液，操作人員在使用時(shí)請(qǐng)帶上手套并注意防護(hù)；在操作過(guò)程中也要避免試劑接觸皮膚和眼睛，如果不慎接觸，請(qǐng)用大量清水清洗；檢測(cè)血液樣本及其它體液樣本時(shí)，請(qǐng)按國(guó)家生物實(shí)驗(yàn)室安全防護(hù)有關(guān)管理規(guī)定執(zhí)行。
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