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| 產(chǎn)地 | 北京 |
| 保存條件 | 2-8℃ |
| 品牌 | Solarbio |
| 貨號(hào) | SEKM-0023 |
| 用途 | |
| 檢測(cè)方法 | 雙抗體夾心法 |
| CAS編號(hào) | |
| 保質(zhì)期 | 6個(gè)月 |
| 適應(yīng)物種 | 小鼠 |
| 檢測(cè)限 | |
| 數(shù)量 | 10 |
| 包裝規(guī)格 | |
| 標(biāo)記物 | IL-22 |
| 純度 | % |
| 樣本 | 血清、血漿或細(xì)胞培養(yǎng)上清液等樣本 |
| 應(yīng)用 | Elisa實(shí)驗(yàn) |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
小鼠白細(xì)胞介素-22ELISA 試劑盒
產(chǎn)品編號(hào)#：SEKM0023
適用于小鼠血清、血漿或細(xì)胞培養(yǎng)上清液等樣本
背景介紹：
白細(xì)胞介素 22是白細(xì)胞介素 10 家族中的一員，與 IL-10 具有相似的結(jié)構(gòu)和免疫作用，，IL-22主要由淋巴細(xì)胞分泌，目前發(fā)現(xiàn)的有 CD4 淋巴細(xì)胞、自然殺傷細(xì)胞、固有淋巴細(xì)胞和少量CD8 淋巴細(xì)胞 。其中 CD4 有 3 類(lèi)細(xì)胞能夠分泌 IL-22，分別為 Thl、Th22 、Th17。轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子 B 能夠抑制 Thl7 表達(dá) IL-22,而腫瘤壞死因子 a 、IL-6 和活性維生素 D 能夠促進(jìn)Th22 表達(dá) IL-22。IL-222 主要作用于非造血源性?xún)?nèi)皮細(xì)胞和基質(zhì)細(xì)胞,最主要的功能是促進(jìn)組織的增殖和再生以及調(diào)節(jié)宿主的黏膜屏障防御。IL-22 在自身免疫性疾病、惡性腫瘤和感染性疾病中都發(fā)揮重要作用。
檢測(cè)原理：
Solarbio (Solarbio ®)ELISA 試劑盒采用基于雙抗體夾心法的酶聯(lián)免疫吸附檢測(cè)技術(shù)。將抗小鼠 IL-22 單*抗體包被在酶標(biāo)板上；分別加入梯度稀釋的標(biāo)準(zhǔn)品和預(yù)稀釋的樣本，標(biāo)準(zhǔn)品和樣本中的小鼠 IL-22 會(huì)與酶標(biāo)板上的包被抗體充分結(jié)合；洗板后加入生物素化抗小鼠 IL-22抗體，該抗體會(huì)與板子上包被抗體捕獲的標(biāo)準(zhǔn)品和樣本中的小鼠 IL-22 發(fā)生特異性結(jié)合；洗板后加入辣根過(guò)氧化物酶（HRP）標(biāo)記的鏈霉親和素，生物素與鏈霉親和素會(huì)發(fā)生高強(qiáng)度的非共價(jià)結(jié)合；洗板后加入顯色劑底物 TMB，若反應(yīng)孔中樣品存在不同濃度的小鼠 IL-22，則HRP 會(huì)使無(wú)色 TMB 變成不同深淺（正相關(guān)）的藍(lán)色物質(zhì)，加入終止液后反應(yīng)孔會(huì)變成黃色；*，在 λmax=450nm（OD=450 nm）處測(cè)定反應(yīng)孔樣品吸光度（OD），樣本中的小鼠 IL-22濃度與 OD 成正比，通過(guò)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)和四參數(shù)擬合軟件便可計(jì)算出樣本中小鼠 IL-22 的濃度。
注意事項(xiàng)：※※※
1. 試劑盒應(yīng)在有效期內(nèi)使用，請(qǐng)不要使用過(guò)期的試劑。
2. 試劑盒未使用時(shí)應(yīng)保存在 2-8℃冰箱，已復(fù)溶但未用完的標(biāo)準(zhǔn)品，請(qǐng)丟棄。
3. 試劑盒使用前請(qǐng)?jiān)谑覝鼗謴?fù) 30min，且充分混勻試劑盒里的各種成份及制備的樣品。
4. 在試驗(yàn)中標(biāo)準(zhǔn)品和樣本建議作復(fù)孔檢測(cè)，且加入試劑的順序應(yīng)保持一致。
5. 為避免交叉污染，請(qǐng)?jiān)谠囼?yàn)中使用 1 次性試管，槍頭，封板膜（※）及潔凈塑料容器。.
6. 濃縮生物素化抗體和濃縮酶結(jié)合物的體積較少，在運(yùn)輸過(guò)程中微量液體會(huì)沾到管壁及瓶蓋上，使用前請(qǐng)離心處理（5-10 S 即可），使管壁上的液體集中在管底部，取用時(shí)，請(qǐng)用移液器小心吹打幾次。
7. 除了試劑盒中的濃縮洗滌液和終止液可以通用外，請(qǐng)不要使用其他來(lái)源試劑盒內(nèi)含的試劑代替本試劑盒中的某單個(gè)組分。
8. 為保證結(jié)果準(zhǔn)確，每次檢測(cè)均需做標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)。
安全提示：試劑盒中的終止液為酸性溶液，操作人員在使用時(shí)請(qǐng)帶上手套并注意防護(hù)；在操作過(guò)程中也要避免試劑接觸皮膚和眼睛，如果不慎接觸，請(qǐng)用大量清水清洗；檢測(cè)血液樣本及其它體液樣本時(shí)，請(qǐng)按國(guó)家生物實(shí)驗(yàn)室安全防護(hù)有關(guān)管理規(guī)定執(zhí)行
自備實(shí)驗(yàn)器材（不提供，可代購(gòu)）
1． 酶標(biāo)儀（主波長(zhǎng) 450nm，參考波長(zhǎng) 630nm）
2． 高精度移液器及一次性吸頭：0.5-10,2-20,20-200,200-1000μl
3． 洗板機(jī)或洗瓶
4． 37℃孵育箱
5． 雙蒸水，去離子水，量筒等
6． 稀釋用聚丙烯試管
樣本收集及儲(chǔ)存：
1. 細(xì)胞培養(yǎng)上清：
將細(xì)胞培養(yǎng)基移至無(wú)菌離心管，在 4℃條件下 1000×g 離心 10 min,然后將上清等量分裝于小 EP 管并于-20℃下保存（24 小時(shí)內(nèi)檢測(cè)可放入 2-8℃儲(chǔ)存），避免反復(fù)凍融。
2. 血清樣本：
室溫血液自然凝固 20 min 后，在 4℃條件下 1000×g 離心 10 min，然后將上清等量分裝于小 EP 管并于-20℃下保存（24 小時(shí)內(nèi)檢測(cè)可放入 2-8℃儲(chǔ)存），保存過(guò)程中如有沉淀，請(qǐng)?jiān)俅坞x心，避免反復(fù)凍融。
3. 血漿樣本：
將全血收集到含抗血凝劑的管中，根據(jù)標(biāo)本的實(shí)際要求選擇 EDTA，檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合 20 min，在 4℃條件下 1000×g 離心 10 min，然后將上清等量分裝于小EP 管并于-20℃下保存（24 小時(shí)內(nèi)檢測(cè)可放入 2-8℃儲(chǔ)存），避免反復(fù)凍融。
※注意：血清血漿樣本避免使用溶血、高血脂樣本，以免影響檢測(cè)結(jié)果；如果樣本中的靶標(biāo)物檢測(cè)濃度高于標(biāo)準(zhǔn)品的*值，請(qǐng)將樣品做適當(dāng)倍數(shù)稀釋后檢測(cè)，建議正式實(shí)驗(yàn)前做預(yù)實(shí)驗(yàn)以確定稀釋倍數(shù)。
